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想知道液相色譜柱在選用前都需要了解些什么嗎?
更新時間:2019-09-24   點擊次數(shù):1654次
   液相色譜柱基于熔融核技術(shù),性能超越傳統(tǒng)全孔5μm和3μm色譜柱,在不增加柱壓的情況下,實現(xiàn)快速分離,可作為傳統(tǒng)5μm色譜柱的新型標(biāo)準(zhǔn)柱。
 
  液相色譜柱的性能特點:
  1、可使用100%水系流動相,柱內(nèi)不會出現(xiàn)坍塌現(xiàn)象;
  2、適合于分離親水性化合物;
  3、與常規(guī)ODS不同的選擇性,加強(qiáng)極性化合物的保留,適合于分離純化肽類和生物分子;
  4、酸性環(huán)境下比普通ODS柱具有更長使用壽命。
 
  在選擇液相色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等。
  1、樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱。
  2、如果樣品極性太強(qiáng),或酸性太強(qiáng);可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長,對流動相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實驗,另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗)
  3、若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因為這樣可增加堿性樣品的保留。
  4、如果堿性化合物的極性太強(qiáng),或堿性太強(qiáng);可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優(yōu)點是方法開發(fā)簡單,缺點是目前實現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,價格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是很經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法)選擇強(qiáng)離子交換柱(缺點是不能用來分析其它樣品,對流動相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實驗)也有使用C18+強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱。
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