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Inertsil Amide色譜柱分析檢測益母草中的鹽酸水蘇堿
更新時間:2018-07-26   點擊次數(shù):3318次

Inertsil Amide色譜柱分析檢測益母草中的鹽酸水蘇堿

中國藥典2010年版(一部)中,對益母草中鹽酸水蘇堿的測定有如下描述:
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以丙基酰胺鍵合硅膠為填充劑,以乙腈-0.2%冰醋酸溶液(80:20)為流動相,用蒸發(fā)光散射檢測器檢測,理論板數(shù)按鹽酸水蘇堿峰計算不得低于6000。
對照品溶液的制備取鹽酸水蘇堿對照品適量,精密稱定,加70%乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液,即得。
供試品溶液的制備取本品粉末(過三號篩)約lg,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入70%乙醇25ml,稱定重量,加熱回流2小時,放冷,再稱定重量,用70%乙醇補足減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得。
本品按干燥品計算,含鹽酸水蘇堿(C7H13O2.HCl)不得少于0.50%。
 為什么需要用丙基酰胺柱來測鹽酸水蘇堿呢?丙基酰胺硅膠基質(zhì)的柱子是什么柱子呢?

 首先我們要了解鹽酸水蘇堿的特性,從鹽酸水蘇堿的結(jié)構(gòu)式來看,即可知道鹽酸水蘇堿的極性是非常大的,普通的反相色譜對它的保留分離能力較弱甚至不保留,而親水型作用色譜柱一般固定相為極性的固定相,因此能為強極性的化合物提供良好的保留,因此是分離這類化合物的*選擇。 
 親水作用色譜(HILIC)作為一種分離極性化合物的液相色譜模式,是一種以極性固定相(如硅膠、烷基酰胺基、二羥丙基,氨基鍵合硅膠等)及水-極性有機溶劑為流動相的色譜分離模式,它與正相色譜相似,水是強溶劑,極性化合物比非極性化合物的保留時間長,與反相色譜的保留順序恰好相反。強極性化合物的分離問題引起了各個研究領(lǐng)域的重視,如藥物分析、代謝組學、蛋白質(zhì)組學等研究領(lǐng)域都不同程度地涉及強極性化合物的分離問題,近年來,HILIC 越來越受到關(guān)注和重視。
 烷基酰胺鍵合硅膠克服了傳統(tǒng)正相色譜柱在水相條件下不穩(wěn)定的缺點,其梯度條件通常是初始為高比例有機相,逐步加大水相含量,極性丙基酰胺鍵合硅膠的HILIC色譜柱在反相條件下,可以有效的保留極性化合物,我公司Inertsil Amide色譜柱,就是一樣一款非常適合于益母草中鹽酸水蘇堿測定的柱子,測定方法及譜圖如下:

1、分析條件

色譜柱:Inertsil Amide 250*4.6*5
柱溫:30℃
流速:1.0ml/min
進樣量: 20ul
檢測器:Alltech 3300 ELSD(漂移管溫度:50度、載氣流量1.5L/min)
流動相:80%乙腈+20% 0.2%冰醋酸溶液
進樣濃度:藥材提取液 1g/25ml提取液

 

 

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